Уксусная кислота для подсчета лейкоцитов. Камеры счётные. Подсчет лейкоцитов в мазке

Сотрудники лабораторий для выявления в крови количества лейкоцитов чаще всего используют камеру Горяева. Подсчет лейкоцитов в камере Горяева является менее точным методом, чем определение лейкоцитов при помощи электронных аппаратов. Величина ошибки составляет ±7 %.

Как осуществляется подсчет

1. В пробирку вливают 0,4 миллилитра жидкости разводящей, а также 0,02 миллилитра крови капиллярной. Готовое разведение считают равным 1:20.
2. В качестве разводящей жидкости как правило используют 3-х или же 5-ти %-ный раствор уксусной кислоты. Ее предварительно подкрашивают метиленовым синим, который при реакции окрашивает ядра лейкоцитов.
3. До начала заполнения камеры Горяева пробирку как можно тщательнее встряхивают. Заполнение камеры производится так же, как и для подсчета эритроцитов.

Особенности расчета

По количеству лейкоциты значительно уступают эритроцитам, именно по этой причине расчет производится в 100 больших квадратах. В 100 квадратах просчитано а лейкоцитов.

При объеме малого квадрата в 14 000 миллиметров кубических и разведении крови в 20 раз расчет количества лейкоцитов производится следующим образом: 4000х20, а после этого делится на 1600. Получается 1/2 х а.

Чтобы получить показатель уровня лейкоцитов в 1 мкл рассчитанный показатель нужно поделить на 2 и добавить еще два нуля.

Отклонение лейкоцитов от уровня свидетельствует о лейкоцитозе и лейкопении, и требует незамедлительного подробного обследования, так как велика вероятность наличия туберкулеза, пневмонии, сепсиса, брюшного тифа, лучевой болезни.

Факторы, влияющие на правильность исследования лейкоцитов

Криоглобулинемия

Парапротеинемия

Нормобласты

Агрегаты тромбоцитов

Нелизированные эритроциты

Длительное хранение крови при комнатной температуре

Возраст Количество лейкоцитов

1 день 11.6 - 22.0

1 неделя 8.1.- 14.3

1 месяц 7.6 - 12.4

1 год 6.8 - 11.0

Взрослые 4.0 - 9.0

Методы определения количества лейкоцитов в крови .

- Подсчет количества лейкоцитов в счетной камере

- Подсчет лейкоцитов в гематологических анализаторах

Определение количества лейкоцитов в счетной камере.

Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

- При наличии в периферической крови ядросодержащих клеток красного ряд, они не лизируются и подсчитываются вместе с лейкоцитами. В этом случае, чтобы определить истинное количество лейкоцитов, из общего числа посчитанных клеток вычитают количество клеток красного ряда.

- Например: Общее количество лейкоцитов при подсчете в камере (или на анализаторе) -45х109/л. При подсчете лейкоцитарной формулы найдено, что на 100 лейкоцитов присутствует 50 эритробластов (нормобластов).

Рассчитываем истинное количество лейкоцитов в крови:

150 клеток - 45 х 109/л

100 клеток (лейкоциты) - X

Х =100*45*10/л /150 = 30*10/л

Таким образом, истинное число лейкоцитов в крови составляет 30 х109/л.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятых в пробирку.

Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты (при концентрации большей, чем 5%, часть лейкоцитов может лизироваться, что приведет к занижению результата).

Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.

Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.

Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева. Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

Методы подсчета тромбоцитов

В счетной камере

Мазках крови

Гематологическом анализаторе

Каждая группа методов имеет преимущества и недостатки.

Подсчет тромбоцитов в камере достаточно точен, не требует для расчета количества эритроцитов. С другой стороны этот метод более трудоемкий, поскольку тромбоциты в нативном виде представлены мелкими и плохо контрастированными элементами. Недостаток метода - подсчет тромбоцитов в ближайшие часы после взятия крови.

Определение количества тромбоцитов в мазках крови значительно уступает по своей точности камерному методу или автоматическим счетчикам. Ошибки при подсчете в мазках крови могут быть обусловлены плохим качеством мазка и связанным с этим неравномерным распределением тромбоцитов, неточным определением количества эритроцитов крови. Существенное неудобство метода - необходимость одновременного подсчета тромбоцитов и эритроцитов в крови. Преимущество его - возможность исследования тромбоцитов в любое время, независимо от момента взятия крови.

Метод определения тромбоцитов с помощью гематологического анализатора позволяет достаточно точно определить количество тромбоцитов, их средний объем и распределение по объему.

Камера Горяева – это приспособление для измерения числа клеток и частиц в определённом объёме жидкости (кровь, моча), состоящее из специального толстого предметного и покровного стёкла.

Предметное стекло имеет углубленную площадку посередине, на которую нанесена сетка из 225 больших квадратов. Из этих квадратов 25 равномерно разделены на 16 меньших квадратов. Благодаря такому объёму сетки подсчёт выполняется точнее, нежели в других ручных счётных устройствах.

Камера Горяева

Обслуживание камеры

После использования инструмента предметное стекло дезинфицируют путём погружения в 4% раствор формалина на час или в 70% раствор этилового спирта на полчаса. После этого камеру тщательно промывают дистиллированной водой. Излишек жидкости убирают мягкой салфеткой. Стоит обратить внимание на то, что камеру нельзя протирать ватным тампоном из-за цепляющихся к ней волокон. Хранится стекло в сухом месте.

Правило Егорова

Во время использования камеры в подсчитываются те ФЭ, которые располагаются внутри квадрата сетки и на верхней и левой линии его периметра. При этом частицы, касающиеся правой и нижней линии периметра во время расчёта данной клетки не включаются.

Определение лейкоцитов в крови

Методика подсчёта лейкоцитов

Подсчёт количества лейкоцитов начинается с разведения крови в 3-5% растворе этановой кислоты с метиловой синью в 20 раз. Рабочий материал перед применением протирают марлей насухо.

Покровное стекло нужно протереть до возникновения цветных колец Ньютона. Далее, камеру заполняют разведённой кровью, при этом первые две капли выпускают на фильтровальную бумагу. Жидкость попадает в камеру благодаря капиллярному свойству воды. Важно проследить, чтобы в желобки при заполнении ничего не затекало. Если это произошло, жидкость аккуратно убирают фильтровальной бумагой. Затем оставляют сетку в покое на минуту, ожидая, пока ФЭ остановят своё движение.

Подсчёт лейкоцитов осуществляется в пределах ста больших квадратов при малом увеличении, то есть при окуляре 10х и объективе 8х, по правилу Егорова. Полученная цифра используется в формуле.

Х = (n × 250 × 20) / 100 или Х = n × 50

Х – количество лейкоцитов.

n – число, полученное в результате подсчёта в камере.

Количество лейкоцитов определяют, принимая во внимание число больших квадратов сетки – 100 и разведение крови – 20.

Как происходит подсчет лейкоцитов

Норма лейкоцитов и отклонения

Норма лейкоцитов у людей составляет 4,0 – 9,0 × 10⁹/л. Или, по-другому, в 1 кубическом мм крови располагается примерно 6000 белых кровяных клеток.

На отклонения от нормы могут влиять внешние физиологические факторы:

• приём пищи перед сдачей крови;
• стресс;
• беременность или менструация у женщин;
• переохлаждение или перегрев;

Если количество белых кровяных клеток превышает 9,0 × 10⁹/л (повышены лейкоциты), такое состояние называется лейкоцитозом. Подобную картину можно увидеть при злокачественных заболеваниях крови, инфекциях, поражениях радиацией и отравлениях.

Лекарственные препараты тоже способны увеличить количество лейкоцитов. Некроз тканей, обильные кровотечения, в том числе в результате операций, почечная кома, болезни сердца – всё это может привести лейкоцитозу.

Падение количества лейкоцитов ниже 3,9 × 10⁹/л называется лейкопенией. Однако у некоторых людей фиксируется постоянное число лейкоцитов в количестве 3,5 × 10⁹/л. Принято считать, что у таких людей сохраняется резерв этих клеток в тканях в 50 раз больше, нежели в крови. Еще встречается функциональная лейкопения после введения анальгетиков, сульфаниламидов и других лекарственных препаратов, после долгой мышечной работы, в результате поражения инфекциями и вирусами (тиф, грипп, корь).

Лейкоцитарная формула

Все виды лейкоцитов составляют лейкоцитарную формулу. По ней можно выявить определённые патологии. Нормы формулы меняются в зависимости от возраста и периода жизни человека. Сдвиг хорошо заметен у женщин во время беременности или после родов.

Применяются разные способы подсчёта соотношения видов этих клеток, но все они связаны с тем, что более тяжелые клетки (базофилы, например) располагаются ближе к краю мазка, а лимфоциты, как легкие клетки, остаются в середине.

• Метод Филипченко. В данном способе подсчёт осуществляется по поперечной прямой границы одного конца к другому. Мазок при этом мысленно разделяют на три части.
• Метод Шиллинга. Лейкоциты подсчитывают в четырех участках мазка.

Полученные данные записываются в таблицу. Индивидуально количество каждого вида белых клеток крови высчитывается по формулам. Отмечаются те элементы, которые попали в поле зрения. Счёт ведётся до того, момента, пока сумма всех подсчитанных клеток не составит 100.

Методика подсчёта лейкоцитов в моче

В моче подсчитывается количество лейкоцитов в камере Горяева по Нечипоренко. Этот анализ нужен для мониторинга заболеваний почек. Периодическое исследование мочи помогает проследить за правильностью лечения и эффективностью назначенной терапии.

Сбор мочи

В изучение идёт только первая утренняя моча в середине мочеиспускания. Для пациента важно следовать основным правилам сбора этого биоматериала. Специальной дополнительной подготовки для исследования не требуется.

Методика расчета

10 мл свежесобранной мочи центрифугируют в течение трёх минут при 2,5 тыс. оборотов в минуту. Перед этим необходимо проследить, чтобы моча, во избежание частичного распада клеток, имела слабокислую реакцию.

При помощи пипетки с узким оттянутым концом убирают верхний слой. В пробирке оставляют от 0,5 мл мочи до 1 мл в зависимости от объёма осадка.

Осадок аккуратно перемешивают с надосадочной жидкостью. Полученным раствором заполняют счётную камеру Горяева по схожему принципу, что используется при подсчёте ФЭ крови. Камеру оставляют в покое от 3 до 5 минут.

Полученная цифра используется в формуле:

Х = (а/0,9) × (1000/V)

Х – число лейкоцитов в 1 мл мочи.

а – подсчитанное количество, делённое на объём камеры в 1 мкл осадка мочи.

v – Количество мочи, взятой для исследования.

1000 – количество осадка.

Это важно! Норма лейкоцитов: в 1 мл мочи не более 2 × 10³ белых кровяных клеток.

Еще:

Разновидности лейкоцитов в крови, в чем их важность для человека?

Лабораторная камера Горяева , названная в честь русского врача, профессора Казанского университета Горяева Н.К., является специальным монолитным предметным стеклом, предназначенным для подсчета количества клеток в заданном объеме жидкости. Кроме того, используя камеру Горяева можно определить увеличение микроскопа. Камеры Горяева широко применяются в области клинических и биомедицинских исследований.

Популярные области применение камеры Горяева:

• Подсчет форменных элементов крови
  • Подсчет эритроцитов
  • Подсчет лейкоцитов
  • Подсчет ретикулоцитов
  • И т.п.
• Подсчет форменных элементов мочи
• Исследование эякулята – оценка количественных и качественных параметров сперматозодиов
• Вычисление концентрации спор в вакцине
• Подсчет ооцист в препарате
• И т.п.

Камеры Горяева выпускаются в двух модификациях: двухсеточные (двухкамерные) и четырехсеточные (четырехкамерные). В определении цены камеры Горяева важную роль играет качество шлифовки стекла, метод нанесения сетки – лазерная гравировка или же вакуумное напыление.

Что собой представляет камера Горяева? Камера Горяева есть не что иное, как прозрачное монолитное предметное стекло поперечными прорезями и нанесенной специальным образом микроскопической сеткой. В случае двухкамерной камеры Горяева мы имеем четыре прорези, образующие три поперечно расположенных площадки, при этом средняя площадка разделена продольной прорезью на две одинаковых камеры, на каждой из поверхности площадки которых нанесена сетка. В случае же четырехкамерной камеры Горяева мы получаем предметное стекло с пятью прорезями, образующих четыре площадки, при этом две внутренние дополнительно разделены продольной прорезью для получения четырех камер с нанесенной микроскопической сеткой на поверхности площадок.

Рассмотрим более подробно особенности сетки . Специальная сетка наносится на внутренние площадки, расположенные ниже соседних боковых площадок на 0.1мм. Боковые площадки предназначены для притирания покровного стекла до появления Ньютоновских колец. Как правило, используют специальное покровное стекло для камеры Горяева с закругленными краями. После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других остаются щели (так называемые, капиллярные пространства), через которые и заполняют камеру. Что конкретно представляет собой сетка? Микроскопическая сетка камеры Горяева расчерчена на большие и маленькие квадраты, сгруппированные различными способами. Сетка Горяева содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом), разграфленных вертикально, горизонтально, крест-накрест и неразграфленных. При этом размеры малых делений клетки сетки составляют 0.05мм, а больших – 0.2мм. Важно, что малый квадрат со стороной 0.05мм во всех сетках является постоянной величиной. Не трудно рассчитать, что площадь малого квадрата равна 0.0025 мм2, а большого квадрата – 0.04мм2. Тогда получаем, что объем жидкости над квадратом, образованным большими делениями сетки Горяева, составляет 0.004 микролитра.

Подсчитав количество форменных элементов (ФЭ) над большим квадратом, можно подсчитать плотность данного типа клеток в суспензии по формуле:

где X - количество ФЭ/мл, M- количество ФЭ над большим квадратом.

При работе с камерой Горяева важно следить, чтобы ее рабочие поверхности оставались сухими и чистыми. Кроме того, при подсчете форменных элементов нельзя допускать наличие воздушных пузырей на сетке камеры, так как они могут мешать точности подсчета.

После работы с камерами Горяева следует выполнить их дезинфекцию одним из допустимых способов:

1. Погружение в 70%-ный раствор этилового спирта на 30 минут
2. Погружение в 4%-ный раствор формалина на 60 минут при комнатной температуре.

Приведем примеры применения камеры Горяева и некоторые формулы.

Практическое применение камеры Горяева

Прежде чем приступить к проведению лабораторных исследований, рекомендуется тщательно протереть камеру Горяева небольшим кусочком чистого бинта, слегка смоченного в спирте. Мы не советуем использовать для этих целей вату, так как она может оставить волокна. Таким же образом следует обработать и покровное стекло для камеры Горяева. Учтите, что при использовании низкокачественного спирта на поверхностях может образоваться осадок, тем или иным образом мешающий проведению исследований. Чтобы избежать появления связанных с этим явлением нежелательных эффектов, рекомендуется дополнительно протереть камеру и покровное стекло чистым марлевым шариком без спирта. Притирание покровного стекла к камере должно быть выполнено очень тщательно до появления на месте контакта радужных колец (так называемых, цветных колец Ньютона) с обоих краев. Для лучшего притирания можно воспользоваться одной хитростью и слегка выдохнуть воздух на камеру и покровное стекло, так чтобы небольшое количество влаги сконденсировалось на поверхностях стекол, что обеспечит лучший контакт.

При отсутствии специальных покровных стекол, прилагающихся к камере Горяева, можно использовать обычные стандартные покровные стекла.

Помимо целевого использования камеры Горяева для подсчета форменных элементов крови и т.п., данное стекло может расцениваться как своеобразный эталон для определения увеличения микроскопа. Для этого следует воспользоваться следующей формулой:

где X – это увеличение микроскопа; p1 – положение левой границы клетки камеры Горяева; p2 – положение правой границы клетки или группы клеток; N – количество клеток между измеряемыми границами; a - размер клетки камеры Горяева (равен 0,05 мм).

Камера Горяева также используется для подсчёта количества клеток в культуре.

Для подсчета клеточных элементов в жидкостях, содержащих их в меньших концентрациях, используются аналогичные по конструкции камеры Фукса-Розенталя и Нажотта , имеющие большую глубину – 0.2 мм и 0.5 мм соответственно. Эти же камеры используются в альгологии для количественного учета фитопланктона. Часто камера Фукса-Розенталя используется для подсчета форменных элементов спинномозговой жидкости. В отличие от камеры Горяева, большие квадраты сетки Фукс-Розенталя не разграфлены и сгруппированы по 16 квадратов, причем каждая такая группа ограничена тройными линиями.

Подсчет форменных элементов крови

Наиболее часто камеры Горяева используются именно для определения форменных элементов крови при проведении лабораторных исследований. Так для подсчета эритроцитов кровь необходимо развести в 200 раз, лейкоцитов – в 20 раз. Количество форменных элементов (ФЭ) в 1мкл крови определяют по формуле:

где N – искомое количество ФЭ в 1 мкл крови; m – число ФЭ в определенном количестве малых квадратов; q – количество малых квадратов сетки камеры Горяева, в которых подсчитывались ФЭ, s – степень разведения крови.

Формула для подсчета эритроцитов

Для подсчета эритроцитов используются 5 больших или 80 малых квадратов сетки, расположенных по диагонали. Таким образом, получаем следующую формулу:

N=m*4000*200/(5*16)=m*10000

Формула для подсчета лейкоцитов

Для подсчета лейкоцитов можно использовать один из трех методов:

1. Лейкоциты считают в 64 больших (пустых) квадратах

N=m*4000*20/(64*16)=m*78,125≈m*78

2. ​ Лейкоциты считают по всей сетке в 169 больших квадратах (рекомендуется для образцов крови с выраженной лейкопенией)

N=m*4000*20/(169*16)≈m*29,6

3. Лейкоциты считают в 100 больших квадратах (64 пустых + 36 разграфленных квадратов по периметру сетки)

N=m*4000*20/(100*16)=m*50

Таблица нормальных значений:

Подсчет форменных элементов в мочевом осадке

Для определения ФЭ в мочевом осадке при анализах мочи по Нечипоренко, Аддис-Каковскому, Амбурже осуществляется по всей сетке Горяева и рассчитывается по формуле:

где N – число ФЭ в 1 мкл осадка; m – число ФЭ, подсчитанных по всей сетке; 0.676 – объем камеры Горяева (мкл)

Для подсчета количества лейкоцитов кровь разводят в 20 раз при помощи реактива – жидкость Тюрка (3% уксусная кислота, подкрашенная метиленовым синим). Кислота разрушает оболочки клеток крови (эритроцитов и лейкоцитов), а метиленовый синий подкрашивает ядро лейкоцитов. Разведение можно делать в лейкоцитарных меланжерах (смесителях) или пробирках.

Для пробирочного способа разведения берут 0,4 мл жидкости Тюрка и добавляют 0,2 мл крови. Полученный раствор перемешивают, заправляют в камеру Горяева, помещают под микроскоп и подсчитывают лейкоциты в сетке Горяева.

Считают в 100 больших неразделенных квадратах. Количество лейкоцитов подсчитывают по формуле:

Х = А * 50

Получаем количество лейкоцитов в 1 мкл крови, например, 4500 (4,5 тыс. в 1 мкл) или 4,5*10 9 /л

Увеличение количества лейкоцитов называется лейкоцитоз . Лейкоцитоз бывает физиологический, медикаментозный и патологический.

Физиологический лейкоцитоз наблюдают при беременности, после приема пищи у моногастричных животных, а также после тяжелой физической нагрузки.

Медикаментозный лейкоцитоз возникает после парентерального введения животным белковых препаратов, вакцин, сывороток и др.

Патологический лейкоцитоз возникает всегда при воспалительных процессах, гнойно-некротических процессах, при инфекционных заболеваниях.

Уменьшение количества лейкоцитов называется лейкопения . Она встречается при истощении, лучевой болезни, при некоторых инфекционных и вирусных заболеваниях.

Изучение морфологии клеток крови

Морфологию клеток крови изучают в мазках крови под микроскопом. Для этого нужно приготовить мазок крови .

Используют чистое обезжиренное стекло.

При приготовлении мазка предметное стекло зажимается между большим и средним пальцами левой руки. В правой руке находится шлифованное покровное стекло. Для получения мазков хорошего качества необходимо брать небольшие капли крови.

Прислонив край покровного стекла к капле крови, которая находится на предметном стекле, дают возможность распределиться ей между двумя стеклами. Если стекла чистые и сухие, кровь, в силу капиллярности, распределяется почти моментально. Угол между покровным и предметным стеклом не должен превышать 45-50 0 . Покровное стекло фиксируется между пальцами правой руки так, чтобы кончик одного или обеих пальцев касался края предметного стекла. В этих случаях мазки получаются с ровными краями. Передвигая покровное стекло по предметному спокойно и не очень быстро, приготовляют мазок. Кровь при движении покровного стекла тянется за стеклом и не подвергается травмированию.

Погрешности при приготовлении мазка

Хорошо приготовленный мазок должен занимать 2/3 стекла и заканчиваться «метелкой».

После приготовления мазок должен высохнуть . Затем проводят его фиксацию с целью предотвращения разрушения клеток крови и закрепления их на стекле.

После фиксации проводят окраску мазков. Существует несколько способов окраски мазков крови:

Метод Романовского-Гимзе . Фиксированные этиловым спиртом (20 минут) или смесью Никифорова (этиловый спирт + этиловый эфир в соотношении 1:1) мазки заливают рабочим раствором красителя Романовского-Гимзе на 20-30 минут. Затем мазки промывают дистиллированной водой, высушивают и микроскопируют. Приготовление рабочего раствора: 2 капли заводского красителя на 1 мл дистиллированной воды.

Метод Май-Грюнвальда . Высушенный препарат фиксируют концентрированным раствором иозина Май-Грюнвальда 3 минуты, промывается дистиллированной водой. Затем мазки окрашиваются рабочим раствором в течение 10 минут, снова промываются дистиллированной водой, высушиваются и микроскопируются.

Есть несколько способов проведения микроскопии в зависимости от качества приготовления мазка.

Если мазок густой, то лучше микроскопировать в области «метелки» однопольным методом.

Равномерный мазок микроскопируют несколькими способами:

Ступенчатый (б)

Однопольный

Трехпольный (а)

Четырехпольный (в)

Мазок крови помещают под микроскоп, наносят каплю инверсионного масла и исследуют.

В первую очередь исследуют ЛЕЙКОЦИТЫ . В зависимости от характера и наличия зернистости в цитоплазме лейкоциты подразделяют на:

Гранулоциты, или зернистые: эозинофилы, базофилы, нейтрофилы; их цитоплазма содержит зернистость;

Агранулоциты, или незернистые: лимфоциты, моноциты; их цитоплазма не содержит зернистости.

При исследовании лейкоцитов выводят лейкограмму – это процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов, записанное в определенном порядке. Сумма клеток лейкограммы должна быть равна 100.

* - абсолютное количество каждого вида лейкоцитов

Б азофилы . Ядро неправильной формы, в цитоплазме содержится зернистость темно-фиолетового цвета. В норме 0,1-0,2, чаще всего в лейкограмме их нет.

Э озинофилы . Содержат в цитоплазме розовую или ярко-красную зернистость (гранулы).

Н ейтрофилы . Их зернистость в цитоплазме практически не видна. В зависимости от зрелости нейтрофилы подразделяются на:

- М иелоциты – незрелая форма нейтрофилов; встречается только при сильной патологии. Содержат округлое ядро.

В процессе созревания происходит центральной вдавливание ядра à Ю ные нейтрофилы: имеет подковообразный вид, встречается только при патологии; незрелая форма нейтрофилов.

- П алочкоядерные нейтрофилы – в норме присутствуют в небольшом количестве (0-5). Относятся к незрелым формам нейтрофилов.

- С егментоядерные нейтрофилы – зрелая форма нейтрофилов. Ядро сегментировано, состоит из 2-5 сегментов, которые соединены тонкими перешейками. Если сегментоядерный нейтрофил «старый», то сегмента ядра отделяются друг от друга и ядро разрушается.

Л имфоциты – крупные клетки, практически целиком состоят из ядра, которое окрашено в темно фиолетовый цвет; цитоплазма светло-голубая, может быть незаметна. Зернистость цитоплазмы отсутствует.

У всех животных, кроме кошки, лимфоцитарный профиль крови; у кошки – нейтрофильный.

М оноциты – крупные клетки с ядром неправильной формы. Зернистости цитоплазмы нет.

Изменение лейкограммы происходит в трех направлениях:

1)Увеличение или уменьшение содержания отдельных видов лейкоцитов, т.е. видовые лейкоцитозы и видовые лейкопении.

2)Появление в лейкограмме молодых и незрелых форм нейтрофилов.

3)Возникновение патологических изменений в ядре и цитоплазме.

Видовые лейкоцитозы и видовые лейкопении

Увеличение базофилов называется базофилия .

Увеличение эозинофилов – эозинофилия .

Уменьшение эозинофилов – эозинопения .

Увеличение любого вида нейтрофилов называется нейтрофилия .

Уменьшение любого вида нейтрофилов называется нейтропения .

Увеличение лимфоцитов – лимфоцитоз .

Уменьшение лимфоцитов – лимфопения .

Увеличение моноцитов – моноцитоз .

Уменьшение моноцитов – моноцитопения .

Увеличение или уменьшение содержания какого-либо вида лейкоцитов может быть абсолютным и относительным.

Абсолютный видовой лейкоцитоз характеризуется увеличением абсолютного числа лейкоцитов данного вида при нормальном или повышенном общем количестве лейкоцитов в крови.

Относительный видовой лейкоцитоз сопровождается уменьшением общего количества лейкоцитов и преобладанием в крови лейкоцитов данного вида за счет уменьшения числа других форм клеток. При этом абсолютное число лейкоцитов преобладающего вида остается в пределах нормы.

Иногда помимо лейкограммы (считают в мазке крови) определяют общее число лейкоцитов и абсолютное содержание лейкоцитов каждого вида в 1 мкл крови (в камере Горяева).

При оценке лейкограммы используют термин «ядро лейкограммы ». Ядром лейкограммы являются нейтрофилы.

При увеличении процента П алочкоядерных лейкоцитов, а также М иелоцитов и Ю ных, говорят о сдвиге ядра влево .

При увеличении процента С егментоядерных лейкоцитов говорят о сдвиге ядра вправо .

Индекс ядерного сдвига определяют по формуле: ИС = .

При нормальном количестве палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов индекс ядерного сдвига не превышает 0,06-0,08.

Ядерный сдвиг от 0,08 до 0,15 называется слабым левым сдвигом.

Ядерный сдвиг от 0,15 до 0,45 называется средним левым сдвигом.

Показатель ядерного сдвига ниже 0,05 указывает на сдвиг вправо .

Нейтрофилия – увеличение любого вида нейтрофилов.

Нейтрофилия со сдвигом ядра влево бывает нескольких разновидностей:

1. Нейтрофилия с простым регенеративным сдвигом характеризуется увеличением числа палочкоядерных нейтрофилов до 10-15%. Процент сегментоядерных клеток при этом в норме или слегла уменьшен. Общее число лейкоцитов увеличено незначительно. Эту разновидность нейтрофилии наблюдают при легко протекающих острых инфекциях, воспалительных и некротических процессах мягких тканей с доброкачественным течением (нагноившиеся раны, местные гнойные отеки).

2. Нейтрофилия с резким регенеративным сдвигом сопровождается появление в крови юных нейтрофилов и иногда миелоцитов, повышением процента палочкоядерных и понижением сегментоядерных нейтрофилов. Общее число лейкоцитов увеличено. Встречается при острых инфекциях, перитоните, воспалительных заболеваниях внутренних органов.

3. Нейтрофилия с дегенеративным сдвигом характеризуется увеличение процента палочкоядерных клеток, появлением дегенеративных форм нейтрофилов, уменьшением сегментоядерных. Общее число лейкоцитов при этом остается в норме или слегка понижено. Такое состояние развивается при длительном воздействии на кроветворные органы бактериальных ядов, химических веществ, при тяжелых гнилостных инвазиях, истощении.

Нейтрофилия со сдвигом ядра вправо характеризуется увеличением процента сегментоядерных нейтрофилов при нормальном или незначительно сниженном проценте палочкоядерных. Она может быть трех вариантов:

1. Незначительное повышение процента сегментоядерных на фоне небольшого лейкоцитоза – наблюдается после кровопотерь, при легком течении инфекционных заболеваний.

2. Увеличение процента сегментоядерных при нормальном или пониженном количестве лейкоцитов – у старых и истощенных животных.

3. Значительное возрастание сегментоядерных при понижении или отсутствии палочкоядерных и выраженной лейкопении – отмечают при хронических септических процессах, онкологии, тяжело протекающих инвазионных заболеваниях.

Нейтропения – понижение общего количества нейтрофилов. Нейтропения наблюдается при инфекционных и вирусных болезнях, протекающих с лимфоцитозом. Нейтропения на фоне гнойно-воспалительного процесса свидетельствует о снижении сопротивляемости организма и неблагоприятном течении заболевания.

Лимфоцитоз – увеличение количества лимфоцитов. Встречается преимущественно при вирусных и бактериальных заболеваниях, при болезнях крови и как относительный лимфоцитоз при нейтропении.

Лимфоцитопения – снижение процента лимфоцитов. Часто лимфоцитопения сопровождает нейтрофилию. Наиболее сильная лимфоцитопения регистрируется при иммунодефицитах.

Моноцитоз – увеличение процента моноцитов. Часто наблюдается на стадии выздоровления, при инфекционных и гнойно-воспалительных заболевнаиях, что указыает на хорошую сопротивляемость организма.

Базофилия – увеличение процента базофилов. Отмечают при гельминтозах, аллергических состояниях, хронических болезнях ЖКТ.

Исследование ЭРИТРОЦИТОВ

Эритроциты здоровых животных имеют следующие морфологические признаки: отсутствие ядра, окрашивание в красноватый или красновато-оранжевый цвет, форма двояковогнутого диска.

Основные отличия эритроцитов разных видов животных – различные размеры эритроцитов и интенсивность центральной зоны просветления.

Также морфологическим признаком, который может присутствовать у здоровых животных, является слипание эритроцитов в виде монетного столбика. Наиболее выражен монетный столбик в крови у лошадей и кошек. У КРС таких образований не наблюдается.

Патологические изменения эритроцитов чаще наблюдаются при анемиях и характеризуются:

1. Изменением размера – анизоцитоз , когда появляются эритроциты больше обычного (макрофитоз) и меньше обычного (микроцитоз);

2. Изменением формы – пойкилоцитоз – появление эритроцитов овальной, звездчатой или любой другой неправильной формы;

3. Изменением окраски – анизохромия – могут появляться гипохромные и гиперхромные эритроциты.

В эритроцитах могут быть обнаружены разные включения.